Cromatografía en columna

cromatografia en columna

¿Qué es la cromatografía en columna?

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Introducción

La cromatografía en columna es un método de separación de mezclas basado en la adsorción. En este método, la mezcla a separar se inyecta en la parte superior de una columna cromatográfica, y el eluyente (solvente) se inyecta por debajo. El eluyente fluye a través de la columna y los componentes de la mezcla se separan en función de su interacción con el adsorbente que se encuentra en la columna. Los componentes de la mezcla se mueven a través de la columna a una velocidad diferente, lo que permite que se separe la mezcla en sus componentes.

Principio de la cromatografía en columna

La cromatografía en columna(CC) se basa en la interacción de los componentes de la mezcla con el adsorbente (sustancia que se encuentra en la columna). Los componentes de la mezcla se adsorben en la superficie del adsorbente en función de su interacción química. La retención de un componente de la mezcla en la superficie del adsorbente se denomina adsorción. La adsorción es una interacción química en la que los átomos o moléculas de una sustancia se adhieren a la superficie de otra sustancia. El adsorbente se selecciona en función de la interacción química que tiene con los componentes de la mezcla. Por ejemplo, si se desea separar una mezcla de compuestos orgánicos, se puede utilizar un adsorbente como el dióxido de carbono.

La interacción química entre el adsorbente y los componentes de la mezcla es débil, por lo que los componentes de la mezcla pueden ser fácilmente desorbidos del adsorbente. La desorción es el proceso mediante el cual los átomos o moléculas se liberan de la superficie de una sustancia. En la cromatografía en columna, la desorción se produce cuando se aumenta la temperatura o se cambia el eluyente. Los componentes de la mezcla se mueven a través de la columna a una velocidad diferente, lo que permite que se separe la mezcla en sus componentes.

Pasos de la cromatografía en columna

La cromatografía en columna se lleva a cabo en tres etapas: la inyección, la separación y la detección. En la etapa de inyección, la muestra se inyecta en la parte superior de la columna. La muestra es generalmente una solución que contiene una mezcla de compuestos. El eluyente se inyecta por debajo de la muestra y fluye a través de la columna.

En la etapa de separación, los componentes de la muestra se separan en función de su interacción con el adsorbente. Los componentes de la mezcla se mueven a través de la columna a una velocidad diferente, lo que permite que se separe la mezcla en sus componentes. Los componentes de la mezcla se desorben del adsorbente y se mueven con el eluyente a través de la columna.

En la etapa de detección, los componentes de la mezcla se detectan mediante un método específico. Los métodos de detección más comunes son la espectroscopía de absorción ultravioleta (UV-vis), la espectroscopía de fluorescencia (FL) y la espectroscopía de infrarrojos (IR).

Ventajas y desventajas de la cromatografía en columna

La cromatografía en columna tiene varias ventajas respecto a otros métodos de separación de mezclas. La cromatografía en columna es un método de separación de alta resolución, lo que permite separar mezclas complexas en sus componentes. La cromatografía en columna también es un método versátil, ya que se puede utilizar con una amplia variedad de adsorbentes y eluyentes. La cromatografía en columna también es un método preciso, ya que permite separar mezclas en pequeñas cantidades.

La cromatografía en columna también tiene varias desventajas. El principal inconveniente de la CC es que es un método lento. Otro inconveniente es que requiere el uso de equipos especializados y el control de un operador experimentado.

La cromatografía en columna es una técnica general utilizada para separar compuestos de mezclas complejas. Puede usar cromatografía en columna a pequeña o gran escala para separar y purificar analitos. La CC tiene dos fases, una fase móvil (líquida) y una fase estacionaria (sólida). La mezcla de compuestos de muestra viaja con la fase móvil a través de la fase estacionaria y la base de diversos grados de adhesión que separa. La cromatografía en columna funciona según el principio de adsorción. Hay cuatro tipos diferentes de cromatografía en columna para varias aplicaciones y que operan en diferentes mecanismos.

Ventajas de la cromatografía en columna:

  1. Mediante la cromatografía en columna, se pueden separar todo tipo de mezclas complejas.
  2. Cualquier cantidad de mezcla se puede separar por cromatografía en columna.
  3. Una amplia gama de fases móviles.
  4. Los analitos se pueden separar y reutilizar en cromatografía de tipo preparativo.
  5. Puede ser posible ejecutar la automatización.
  6. Es un método robusto.

Desventajas de la cromatografía en columna:

  1. Se tarda más en separar los compuestos.
  2. La CC tiene un poder de separación pobre en comparación con las técnicas de separación avanzadas.
  3. Se requieren mayores cantidades de disolventes, lo que es más caro.
  4. La automatización lo hace más complejo y costoso.

Referencias

Wikipedia- es.wikipedia.org/wiki/Cromatografia en columna

Analista de Laboratorio

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