Efecto del pH en cromatografía de fase inversa

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Efecto del pH en cromatografía de fase inversa

El pH de la fase móvil en HPLC de fase inversa es un factor importante, puede afectar a la forma del pico así como al tiempo de retención de la molécula, ya que afecta al estado de ionización de la molécula y, por tanto, la química de las interacciones en la molécula. Columna HPLC. Por tanto, es importante mantener el ph correcto para el compuesto que se puede ver afectado por el cambio de pH de la fase móvil y el tampón. La trietilamina y el ácido trifluoroacético son modificadores habituales de la fase móvil, pero no mantienen el pH, necesita una solución tampón para ello.
Resisten un cambio de pH cuando se añaden pequeñas cantidades de ácido o álcali. Una solución tampón contiene una mezcla de una base débil y su ácido conjugado (o un ácido débil y su base conjugada).
El efecto del pH de la fase móvil en la cromatografía líquida de alto rendimiento puede influir en la selectividad, tiempo de retención y robustez del método.
Selectividad:
Los minúsculos cambios en el pH de la fase móvil también pueden tener un efecto espectacular sobre la selectividad de los analitos poco ionizables.
El tiempo de retención del analito:
Cuando el pH de la fase móvil cambia, se produce un cambio dramático en el tiempo de retención de los analitos ácidos y básicos. Cuando se cambia la ionización de estas moléculas, a menudo es el resultado de diferentes interacciones entre la columna y las moléculas.
Método robustez:
Para obtener la mejor rugosidad, elija un pH para el tampón o la fase móvil donde la selectividad y la RT no cambien si los ligeros cambios de pH.

Analista de Laboratorio

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