HPLC PPT - Introducción a la cromatografía líquida de alta resolución

La cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) es una técnica popular y versátil que proporciona soluciones asequibles para la separación, identificación y cuantificación de constituyentes de muestras orgánicas complejas.

A primera vista, es posible que se sorprenda por el ensamblaje de módulos complejos y muchas tuberías. Sin embargo, cuando se obtenga información sobre la función de cada parte, el misterio se revelará y el sistema de HPLC demostrará ser un dispositivo fácil de usar que, si se mantiene adecuadamente, garantizará la mayor precisión y confiabilidad de los resultados análisis tras análisis.

Esta presentación de Power Point sobre Introducción a la cromatografía líquida de alta resolución es una introducción breve y concisa a los componentes de la HPLC. Es importante comprender las partes individuales y cómo cada una contribuye a la confiabilidad general del análisis. Su mayor nivel de comodidad le hará darse cuenta de que HPLC es un sistema fácil de usar y promete infinitas aplicaciones.

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Introducción a la cromatografía líquida de alta resolución y sus componentes

El equipo de cromatografía parece bastante intimidante para cualquiera que no haya trabajado con él antes, pero al inspeccionarlo más de cerca y familiarizarse con el equipo, se da cuenta de que detrás de la red de cables, conductos y circuitos complejos hay una máquina simple con solo unas pocas piezas clave.

Diferentes combinaciones de estas partes, a saber:

Zapatillas
detectores
Los inyectores proporcionan un número infinito de configuraciones según la aplicación.

Así como la comprensión de la anatomía humana te hace consciente del papel vital de cada órgano del cuerpo para tu bienestar y vitalidad. Asimismo, debe tener un buen conocimiento de los componentes de su sistema de HPLC para generar datos con la máxima fiabilidad.

Una comprensión conceptual de la función de cada parte contribuirá a su nivel de comodidad con su sistema HPLC. Garantiza un uso a largo plazo con una alta dependencia de los datos de salida.

¿Qué es HPLC?

HPLC es una técnica para separar, identificar y cuantificar los componentes de una mezcla. Está especialmente indicado para compuestos que no se volatilizan fácilmente, son térmicamente inestables y tienen un alto peso molecular.

Fase móvil

La fase líquida se bombea a una velocidad constante a la columna llena con la fase estacionaria. Antes de ingresar a la columna, la muestra analítica se inyecta en la corriente portadora.

Al llegar a la columna, los componentes de la muestra se retienen selectivamente en función de las interacciones fisicoquímicas entre las moléculas del analito y la fase estacionaria.

Fase móvil

La fase móvil sirve para transportar la muestra al sistema. Los criterios esenciales de la fase móvil son la inercia de los componentes de la muestra. A menudo se utilizan disolventes puros o combinaciones de tampones. La fase móvil debe estar libre de partículas contaminantes y desgasificada antes de su uso.

Yacimientos de fase móvil

Son recipientes inertes para almacenamiento y transporte en fase móvil. En general, se utilizan botellas de vidrio transparente para facilitar la inspección visual del nivel de la fase móvil en el recipiente. Los filtros de hollín de acero inoxidable están instalados en el interior para eliminar cualquier partícula de hollín en la fase móvil.

Zapatillas

Las variaciones en las tasas de flujo del tiempo de elución de la fase móvil de los componentes de la muestra dan como resultado errores. Las bombas proporcionan un flujo constante de fase móvil a la columna bajo presión constante.

inyectores

Los inyectores se utilizan para proporcionar una inyección de volumen constante de la muestra en la corriente de fase móvil. La inercia y la reproducibilidad de la inyección son necesarias para mantener un alto grado de precisión.

Columna

Una columna es un tubo de acero inoxidable lleno de fase estacionaria. Es una pieza esencial y debe mantenerse adecuadamente de acuerdo con las instrucciones del proveedor para obtener la reproducibilidad y la eficiencia de separación ciclo tras ciclo.

Horno de columna

La variación de la temperatura durante la ejecución analítica puede provocar cambios en el tiempo de retención de los componentes de elución separados. Un horno de columna mantiene una temperatura de columna constante por medio de la circulación de aire. Esto asegura un caudal constante de la fase móvil a través de la columna.

Detector

Un detector proporciona una respuesta específica para los componentes separados por la columna y también proporciona la sensibilidad requerida. Debe ser independiente de cualquier cambio en la composición de la fase móvil. La mayoría de las aplicaciones requieren detección UV-VIS, aunque hoy en día también son populares los detectores basados en otras técnicas de detección.

Adquisición y control de datos

Los sistemas de HPLC modernos están basados en computadora y el software controla los parámetros operativos, como la composición de la fase móvil, la temperatura, el caudal, el volumen y la secuencia de inyección, así como la adquisición y el manejo de la salida.

Versiones especializadas

Los sistemas de HPLC especializados también pueden tener válvulas de selección de solventes, desgasificadores de vacío, muestreadores automáticos, interruptores de columna, derivatización antes o después de la columna y colectores de fracciones. Todos estos están cubiertos en detalle en nuestro programa de certificación en línea en HPLC. Curso Certificado en HPLC