Avances en Fases Estacionarias de HPLC en Columnas de HPLC Monolíticas

Las fases estacionarias para HPLC han evolucionado de partículas irregulares a partículas esféricas a partículas de menos de 2 my tecnologías de capa nuclear. Se han observado avances paralelos en el desarrollo de juntas monolíticas.

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Crédito: Instituto Barnett de Análisis Químico y Biológico

Un monolito se puede visualizar como una estructura similar a una 'roca sólida' sin espacios. Estos proporcionan distancias de difusión más cortas y múltiples caminos para la dispersión de solutos. La estructura porosa en forma de barra es altamente permeable y ofrece una gran área de superficie para la separación en comparación con las fases estacionarias basadas en partículas. Las columnas monolíticas están basadas en sílice o tienen una columna vertebral de polímero orgánico.

histórico

Richard Synge imaginó el monolito en 1952 como un bloque continuo de gel poroso. La idea surgió en los años 60 y 70 cuando se introdujo la espuma de poliuretano. No fue sino hasta finales de la década de 1980 que se desarrollaron los geles hidrofílicos y las varillas de sílice.

Ventajas sobre las columnas de HPLC en fase de partículas

  • Los monolitos de alta permeabilidad ofrecen una gran cantidad de canales de flujo y un área de contacto alta. Estas características ofrecen varias ventajas sobre las fases de partículas sólidas.
  • La disminución del tamaño de las partículas va acompañada de un aumento de la contrapresión de la columna y requiere el uso de sistemas UHPLC más caros. Los problemas de contrapresión se superan fácilmente cuando se utilizan columnas de HPLC monolíticas.
  • Los monolitos son ideales para separaciones de moléculas grandes, ya que tales moléculas causan complicaciones de contrapresión en las columnas de partículas.
  • Las columnas monolíticas polimerizadas in situ evitan la variabilidad de columna a columna y minimizan las variaciones de flujo móvil debidas a los efectos de pared.
  • Las columnas de HPLC Monolith son más sólidas y exhiben robustez mecánica en comparación con las columnas de partículas empaquetadas.
  • Las columnas de partículas empaquetadas requieren un entorno solvente y cualquier exposición al aire se secará, lo que puede causar daños irreparables. Tales problemas no ocurren con columnas monolíticas.
  • Las columnas de HPLC Monolith tienen una vida útil más larga en comparación con las columnas de partículas debido a una mayor resistencia al impacto, una mayor tolerancia a la temperatura y la capacidad de soportar medios con un rango de pH más amplio.

Principales áreas de aplicación

Debido a la multitud de ventajas, las columnas de HPLC monolíticas ofrecen oportunidades prometedoras para aplicaciones biotecnológicas que cubren campos especializados como la genómica, la proteómica, la metabolómica y la farmacogenómica. La respuesta rápida y la alta resolución de moléculas grandes han permitido el control cromatográfico en tiempo real de los procesos de fermentación. Los estudios farmacéuticos, alimentarios, forenses y clínicos son otras áreas en las que las columnas monolíticas serán prometedoras en un futuro próximo.

Nano HPLC es otra área donde las columnas monolíticas tienen potencial futuro. La permeabilidad del empaque monolítico evita el problema de contrapresión asociado con empaques de menos de 2 m y es posible usar columnas con un DI muy bajo del orden de 20 m con columnas de gran longitud.

Proveedores de Columna de HPLC del monolito

Las separaciones BIA introdujeron primero las columnas de HPLC monolíticas poliméricas, seguidas por Merck, que desarrolló y produjo monolitos de sílice con su línea de productos Chromolith. Luego, la línea de productos pasó a Phenomenex, que también introdujo la línea Onyx en 2005. Dionex fue pionera en monolitos de polímero y actualmente se puede acceder a algunos recursos desde los siguientes enlaces:

Las columnas monolíticas son una gran promesa para el futuro. Si se ha encontrado con este tipo de columnas, comparta su experiencia y deje sus comentarios.

Analista de Laboratorio

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