Principio de la espectroscopia de fluorescencia

Principio de la espectroscopia de fluorescencia

La fluorescencia es la emisión de luz de una molécula, que vuelve desde el nivel de vibración más bajo de un estado excitado único a su estado básico normal. Emocionado por las moléculas, se logra exponiendo la fuente de luz de la longitud de onda especificada. En qué momento la molécula/compuesto es fluorescente, una parte de la luz absorbida se convierte en luz de fluorescencia, una emisión de luz a una longitud de onda inferior. La intensidad de la fluorescencia es directamente proporcional a la concentración de las especias fluorescentes.
Obviamente, la relación lineal entre la concentración y la intensidad fluorescente cae sólo a la solución diluida a concentraciones elevadas, hace necesario establecer primero una concentración para detectar la concentración de gráfico fluorescente y muestra desconocida con estándares conocidos. La fluorometría se utiliza para la determinación de la concentración de fluoróforos, proporciona una absorción sensible más que el método colorimétrico.
En realidad, existe una fuente de luz fuerte en una unidad, un sistema de enfoque, un compartimiento de muestra, un filtro primario para elegir la longitud de onda adecuada de la fuente de excitación, un filtro secundario permite la transmisión de fluorescencia y absorbe la radiación de excitación dispersa, un amplificador electrónico, un fotocélula y el sistema de medida. Para reducir la interferencia de la fuente primaria, la fluorescencia se recoge en un ángulo de 90 grados. Un obturador permite que el haz de la fuente caiga sobre la muestra sólo durante toda la medida.

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