Selección de fase móvil en LC-MS

El uso de una fase móvil volátil es un buen punto de partida. Así como las fases móviles esenciales como el metanol, el agua, el acetonitrilo y el ácido acético también se utilizan generalmente para regular los niveles de pH. Para soluciones tampón, el acetato de amonio y el formado de amonio se utilizan habitualmente ya que son sales volátiles. Además, para facilitar la separación de los analitos polares mediante cromatografía líquida en fase inversa, los reactivos de pares de iones volátiles pueden añadirse a la fase móvil. Estos reactivos tienen un grupo iónico polar y una larga cola hidrofóbica, que se adhiere a la fase estacionaria.

En presencia de reactivos de pares de iones, las moléculas polares interaccionan con los grupos iónicos cargados del reactivo de pares de iones y se separan en la columna HPLC de fase inversa. Con un enfoque en la eficiencia de la ionización, los disolventes son necesarios para producir iones de reacción para la APCI, y los disolventes polares son necesarios para la ESI porque son esenciales para disolver las moléculas polares.

Los disolventes más utilizados por lo general consisten en acetonitrilo de grado LC-MS y agua, incluidos agentes de apareamiento de iones como el ácido fórmico, el ácido trifluoroacético. A continuación se muestran algunos ejemplos de las fases móviles que se utilizan en el análisis de LC-MS.

Ácido trifluoroacético (TFA)
Ácido fórmico (FA)
0,1% TFA en acetonitrilo,
0,1% TFA en agua,
0,1% FA en acetonitrilo
0,1% FA en el agua

Intente evitar el uso de tampones de fosfato en cromatografía líquida-espectrometría de masas, ya que existe una acumulación de especies no volátiles, por lo que bloquean el orificio de la muestra.