Ventajas y desventajas de la elución de gradiente en HPLC
La fuerza de elución aumenta durante la separación cambiando paulatinamente la composición de la fase móvil en la elución en gradiente. Así, disminuye el tiempo de análisis y mejora la calidad de la separación y el límite de detección. Incluso si el método del gradiente es más complejo en comparación con la elución isocrática.
Ventajas de la elución de gradiente:
El modo HPLC de gradiente tiene la capacidad de separar muestras complejas.
Este método aumenta la sensibilidad.
La elución del gradiente tiene tiempos de análisis más cortos y da picos cromatográficos mucho más estrechos.
Da una resolución mejorada.
Puede reducir la degradación de la columna debido a los analitos fuertemente retenidos.
El método HPLC de gradiente también mejora la eficiencia de la columna HPLC.
éste es el mejor método comparado con una elución isocrática para limpiar la columna.
Desventajas de la elución del gradiente:
Para fluir la fase móvil en elución paulatina, se necesita una bomba HPLC especial, que es más cara.
Entre inyecciones consecutivas, debe reequilibrarse con la composición inicial de la fase móvil.
Existe un problema de transferencia de métodos, ya que los instrumentos varían en su volumen de residencia.
La precipitación es posible cuando se utilicen múltiples válvulas proporcionales.
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