¿Qué causa el arrastre máximo y el frente?

cromatografia liquida

¿Qué causa el arrastre máximo y el frente?

Tanto la cromatografía de gases como la cromatografía de líquidos de alta resolución tienen como objetivo lograr una buena separación y una forma de pico simétrica. La cola y el frente de pico son los problemas de forma de pico cromatográfico más comunes en el desarrollo de métodos. Cada cromatógrafo debe saber cómo resolver estos problemas, pero primero, identifiquemos qué causa colas y frentes de picos.
Las razones comunes para la fachada de pico se dan a continuación.
  • Ejemplo de sobrecarga o ensuciamiento de columna:
El frente de pico indica si la columna analítica excede la capacidad de la muestra, lo que puede ocurrir en las separaciones de GC y HPLC.
  • Mala capacidad de muestra/pico:
Si el analito no tiene suficiente retención en la columna de HPLC, no se produce una separación adecuada.
  • Saturación del detector:
Así como la forma del pico puede cambiar con la sobrecarga de la columna, la sobrecarga del rango de medición del detector también puede provocar la pérdida de saturación y precisión de la señal.
La columna mal empacada, la canalización en una columna empacada, la ruta de entrada de volumen muerto y la fase móvil demasiado baja también son causas de frente de pico.
Las razones comunes para la resistencia máxima se dan a continuación.
  • Difusión por trayectoria de flujo:
Conectores/accesorios mal ajustados, una columna con una línea de conexión capilar de tamaño incorrecto pueden causar colas en los picos.
  • Dependencia del pH para moléculas ionizables:
Si hay una diferencia de 2 unidades de pH entre el pKa de la muestra y la fase móvil, y cuando la muestra se ioniza fácilmente, pueden producirse colas en los picos.
  • Ejemplo de sobrecarga o ensuciamiento de columna:
Si la columna no se lava correctamente después de cada ejecución, se puede formar con el tiempo y alterar la química superficial de la fase estacionaria.

Puede haber muchas razones para seguir y hacer frente. Algunas posibles causas son:

  • Efectos de columna adicionales como sobrecarga de columna
  • El caudal de la fase móvil es demasiado bajo
  • El vacío a la entrada de la columna.
  • Si la concentración de tampón es demasiado baja
  • Cambio de la composición de la fase móvil
  • frita bloqueada
  • columna contaminada
  • Muestra que reacciona con sitios activos
  • pH incorrecto de la fase móvil/tampón

Analista de Laboratorio

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