La principal diferencia entre HPLC y LC-MS es que HPLC utiliza tampón fosfato en la fase móvil, mientras que LC-MS utiliza ácido fórmico para evitar la contaminación por MS. MS es 1000 veces más sensible a que el detector UV o PDA utilizado en HPLC.
La cromatografía es una técnica de separación en química, en la que los analitos se separan mediante la fase móvil y la fase estacionaria. Existen distintos tipos de cromatografía como la cromatografía en papel, la cromatografía en columna, la cromatografía de capa fina (TLC) y la cromatografía de gases, la cromatografía de adsorción, la cromatografía de partición y la afinidad, etc. Cada tipo funciona con un principio distinto.
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El HPLC es un método de separación, mientras que el MS se utiliza para evaluar la relación masa-carga de partículas cargadas, en la que las condiciones cromatográficas de ambas técnicas son aproximadamente las mismas. La técnica de combinar HPLC y MS se conoce como LC-MS. La combinación de ambas técnicas reduce el error y mejora la precisión. La cromatografía líquida-espectrometría de masas es valiosa en aplicaciones que contienen un gran número de compuestos.
¿Qué es HPLC?
La cromatografía líquida de alto rendimiento es un proceso de criba popular utilizado en química analítica para identificar y cuantificar cada compuesto de una mezcla de muestra. Al basarse en bombas para fluir un disolvente líquido a presión que contenía la combinación de muestras a través de una columna llena de un material absorbente sólido (generalmente, sílice), esta técnica se conocía anteriormente como cromatografía líquida de alta presión.
La muestra se inyecta a través del inyector y la fase móvil la hace fluir por la columna. El material adsorbente sólido interacciona de forma diferente con cada analito de la mezcla de muestra, dando lugar a diferentes caudales para varios analitos. El tiempo de separación y retención depende de la afinidad del analito hacia la fase estacionaria.
¿Qué es LC-MS?
La LC-MS es una técnica analítica de muestras que combina cromatografía líquida (LC) y espectrometría de masas (MS). La espectrometría de masas se utiliza para determinar la relación masa-carga de partículas cargadas, mientras que la cromatografía líquida es una técnica de separación.
En comparación con HPLC, LCMS es una técnica analítica popular con alta sensibilidad, precisión y especificidad. Como resultado, tiene una amplia gama de aplicaciones, como análisis farmacéuticos, ambientales, de investigación y alimentos, etc. En presencia de mezclas de muestras complejas, LCMS se utiliza principalmente para separar, detectar, identificar y cuantificar las propiedades bioquímicas de una muestra concreta.
Diferencia entre HPLC y LCMS:
- El HPLC es una técnica de separación que se utiliza principalmente para separar, identificar y determinar cada componente de la muestra de una mezcla compleja, mientras que LC-MS es un sistema híbrido en el que un detector de HPLC UV o PDA se sustituye por un espectrómetro de masas.
- La precisión y la sensibilidad de los resultados del HPLC son inferiores a la LCMS, mientras que los resultados del LCMS son altamente precisos y sensibles que el HPLC.
- El HPLC es un método que consume más tiempo que el LCMS, mientras que el LCMS tiene un análisis más rápido que el HPLC.
- El HPLC es sólo una técnica de cromatografía líquida, mientras que la LCMS es una combinación de cromatografía líquida y el método de espectroscopia de masas.
- El HPLC puede considerarse como un componente del LCMS, mientras que el LCMS puede considerarse como un componente del HPLC.
- El análisis HPLC es menos específico que el LCMS, mientras que el análisis LCMS es más específico que el HPLC.
- Mediante una HPLC se pueden analizar las biomoléculas, moléculas orgánicas, polímeros e iones, mientras que con un LCMS se pueden analizar las biomoléculas y moléculas orgánicas.
- Un instrumento de cromatografía líquida de alto rendimiento carece de una fuente de iones, mientras que en el instrumento de cromatografía líquida-espectrometría de masas la fuente de iones está presente.
¿Qué es mejor HPLC o LCMS?
LCMS es más preciso, específico, preciso y sensible que el HPLC. El HPLC forma parte de la LC-MS que separa a los solutos dentro de una muestra, y el espectrómetro de masas ofrece datos de relación masa-carga que pueden ayudar a determinar la identificación estructural del compuesto.
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