Cómo aumentar la respuesta máxima en HPLC

Como es sabido, la cromatografía líquida de alta resolución es una técnica de separación en química analítica. En HPLC, los parámetros de idoneidad del sistema, como el factor de arrastre, el número de platos teóricos y la resolución, son los más importantes. La respuesta del pico también es importante porque el área del pico se usa para determinar la concentración de moléculas. Los factores de respuesta son importantes cuando se utiliza HPLC para el análisis cuantitativo. Hay diferentes tipos de detectores utilizados en HPLC como UV, PDA. La señal de salida del detector es una función de la concentración de moléculas que pasan a través de la celda del detector.

Aquí hay algunos puntos que ayudan a aumentar la respuesta máxima.

Inyectar más muestra o concentraciones de muestra más altas en el inyector de HPLC es una de las técnicas más sencillas para aumentar la respuesta máxima.
La longitud de onda del componente debe confirmarse con un espectrofotómetro UV/VIS porque si seleccionamos una longitud de onda correcta, puede aumentar la respuesta máxima en HPLC.
El volumen pico está asociado con el volumen de la columna. Por lo tanto, una columna más pequeña también disminuirá el volumen del pico y aumentará proporcionalmente la altura del pico. Una técnica simple para reducir el volumen de la columna es reducir el diámetro de la columna y mantener las mismas propiedades para las otras columnas. Otra forma de disminuir el ancho del pico es usar una columna con un número de plato teórico más alto. Esto se hace más fácilmente mediante la reducción del tamaño de partícula.
El aumento del caudal del sistema reducirá la respuesta del detector, por lo que el caudal debe ser el adecuado.