Principio básico de la cromatografía en capa fina

Principio básico de la cromatografía en capa fina

En la cromatografía en capa fina (TLC), los analitos o la mezcla de muestra se aplica como punto minuto o punto en la parte inferior de la fase estacionaria que aguanta sobre una placa de vidrio, metal o plástico. Se deja evaporar un disolvente de la muestra de la placa, que después se coloca en una cámara cerrada, en la que en la parte inferior hay una piscina poco profunda de la fase móvil. La fase móvil pasa por fuerzas capilares a través de la fase estacionaria. Los componentes de la mezcla de analito se desplazan a diferentes velocidades a lo largo del movimiento por la fase estacionaria de la fase móvil Mientras que la fase móvil ha tomado una distancia adecuada, de la placa de la cámara se elimina y se marca el frente de disolvente y mediante el secado a temperatura ambiente el La fase móvil se evapora de la placa o colocando un horno. Si los componentes de la mezcla no son de color o fluorescentes de forma natural, se aplicará un reactivo de identificación para ver las bandas. Para garantizarlo, se hace el uso de una o más técnicas de identificación para detectar todos los componentes de la mezcla. El valor Rf es un método adecuado para expresar la posición de un analito en un cromatograma establecido y se calcula cómo, Rf ¼ Distancia del analito desde el origen/distancia del disolvente desde el origen.

Se utilizan distintos tipos de disolventes como fases estacionarias en TLC; consisten en gel de sílice, gel de sílice modificado químicamente, intercambiadores de iones, poliamidas, alúmina y celulosa. Ahora, las placas TLC de alto rendimiento prerevestidas con partículas finas se utilizan generalmente en la industria farmacéutica para separaciones reproducibles, rápidas y eficientes. Las opciones para la fase móvil son de un sistema de disolventes de componentes solitarios de muchos sistemas de disolventes de componentes, siendo los sistemas de disolventes de múltiples componentes los más comunes. El movimiento de cada analito en la mezcla de fase móvil a lo largo del TLC es el resultado de fuerzas múltiples opuestas, por ejemplo, la acción capilar de la fase móvil y la acción de retraso de la fase estacionaria. Ambas fuerzas dan para conseguir la migración de cada analito.