¿Cuáles son las causas del peak tailing y fronting

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¿Cuáles son las causas del peak tailing y fronting?

La cromatografía de gases y la cromatografía líquida de alto rendimiento tienen como objetivo conseguir una buena separación y forma de pico simétrica. La cola de pico y el fronting son los problemas de forma de pico cromatográficos más habituales en el desarrollo del método. Todos los cromatógrafos deben averiguar cómo solucionar estos problemas, pero primero, identificamos cuáles son las causas de los picos de cola y fronting.

A continuación se indican los motivos habituales del fronting máximo.

  • Sobrecarga de la muestra o de la columna:

El frente de picos muestra si la columna analítica supera la capacidad de muestreo, que puede producirse tanto en separaciones GC como HPLC.
  • Poca capacidad de muestra/pico:

Si el analito no tiene una retención suficiente en la columna HPLC, no se produce una separación adecuada.
  • Saturación del detector:

De la misma forma que la forma del pico puede cambiar con la sobrecarga de la columna, la sobrecarga del rango de medida del detector también puede provocar una pérdida de saturación y precisión de la señal.
La columna mal empaquetada, la canalización en una columna empaquetada, la trayectoria de entrada del volumen muerto y la fase móvil demasiado débil también son causas del frente de pico.

A continuación se exponen los motivos habituales del pico de cola

  • Difusión del camino del flujo:

Los conectores/accesorios mal ajustados, una columna con una línea de conexión capilar de tamaño incorrecto puede provocar un pico de cola.
  • Dependencia del pH para moléculas ionizables:

Si existe una diferencia de 2 unidades de pH entre el pKa de la muestra y la fase móvil, y cuando la muestra se ioniza fácilmente, se puede producir el pico de cola.
  • Sobrecarga de la muestra o de la columna:

Si la columna no se lava correctamente después de cada análisis, puede formarse con el tiempo y cambiar la química superficial de la fase estacionaria.

Puede haber muchas razones para la cola y la frente. Algunas posibles causas son:

  • Efectos de columna adicionales, como la sobrecarga de la columna
  • El caudal de la fase móvil es demasiado bajo
  • El vacío en la entrada de la columna
  • Si la concentración de tampón es demasiado baja
  • Cambio en la composición de la fase móvil
  • Frito bloqueado
  • Columna contaminada
  • Muestra que reacciona con los sitios activos
  • pH incorrecto de la fase móvil/tampón

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Analista de Laboratorio

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