5 Tipos de microscopios con definiciones, principios, usos, diagramas etiquetados

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5 tipos de microscopios

Hay principalmente 5 tipos comunes de microscopios de la siguiente manera:

  1. Microscopio de luz o de campo óptico
  2. Microscopio de campo oscuro
  3. Microscopio de contraste de fase
  4. microscopio de fluorescencia
  5. microscopio electronico

Un buen microscopio debe tener tres propiedades:

  1. Buena resolución: El poder de resolución se refiere a la capacidad de producir imágenes separadas de objetos cercanos para que puedan distinguirse como dos entidades separadas. El poder de resolución de:
    • El ojo humano solo mide aproximadamente 0,2 mm (200 μm)
    • El microscopio óptico mide aproximadamente 0,2 μm.
    • Un microscopio electrónico mide aproximadamente 0,5 nm.
      La resolución depende del índice de refracción. El aceite tiene un índice de refracción más alto que el aire.
  2. Buen contraste: Esto se puede mejorar aún más tiñendo la muestra.
  3. Buen aumento: Esto se logra mediante el uso de lentes cóncavas.

tipos de microscopios

El microscopio óptico o de campo brillante forma una imagen oscura sobre un fondo más brillante.

Diagrama etiquetado bajo el microscopio óptico

Principio: En un microscopio de campo oscuro, el objeto aparece brillante contra un fondo oscuro. Esto es posible gracias al uso de un condensador especial de campo oscuro.

Aplicaciones: Se utiliza para identificar células vivas no teñidas y bacterias delgadas, como las espiroquetas, que no se pueden ver con un microscopio óptico.

Microscopio de campo oscuro

Se utiliza para visualizar células vivas creando una diferencia de contraste entre las células y el agua. Convierte ligeras diferencias en el índice de refracción y la densidad celular en cambios fácilmente detectables en la intensidad de la luz.

Es útil para estudiar:

  • motilidad microbiana
  • Determinación de la forma de las células vivas.
  • Detección de componentes bacterianos como endosporas y cuerpos de inclusión.

Contraste microscopico

Principio: Cuando los tintes fluorescentes se exponen a los rayos ultravioleta (UV), se excitan y se dice que son fluorescentes, lo que significa que convierten estos rayos invisibles de longitud de onda corta en luz de longitud de onda más larga (luz visible).

Aplicaciones: El microscopio de epifluorescencia tiene las siguientes aplicaciones:

  • Autofluorescencia, cuando se coloca bajo una lámpara UV, por ejemplo ciclospora
  • Los microbios recubiertos con el tinte fluorescente, p. naranja de acridina para los parásitos de la malaria (QBC) y fenol auramina para Tuberculosis M..
  • Inmunofluorescencia: utiliza un anticuerpo marcado con colorante fluorescente para detectar antígenos de la superficie celular o anticuerpos unidos a antígenos de la superficie celular. Hay tres tipos: IF directa, IF indirecta y citometría de flujo.

Microscopio fluorescente

Fue inventado por Ernst Ruska en 1931. Se diferencia de un microscopio óptico en varios aspectos.

Hay dos tipos de EM:

  • transmisión electromagnética (Tipo MC, examina la estructura interna, resolución 0.5nm, ofrece una vista bidimensional)
  • escaneo EM (superficies de examen, resolución de 7 nm, proporciona una vista tridimensional)

Principio del microscopio electrónico de transmisión (TEM)

Microscopio electrónico de transmisión (TEM)

Preparación de la muestra: Las celdas se someten a los siguientes pasos para preparar muestras muy finas (de 20 a 100 nm de espesor)

  • Fijación: Las células se fijan utilizando glutaraldehído o tetróxido de osmio para la estabilización.
  • Deshidración: A continuación, la muestra se deshidrata con disolventes orgánicos (por ejemplo, acetona o etanol).
  • Incrustación: La muestra se incorpora a un polímero plástico y luego se cura para formar un bloque sólido. La mayoría de los polímeros plásticos son insolubles en agua; por lo tanto, se requiere una deshidratación completa de la muestra antes de su inclusión.
  • Rodaja: Luego, la muestra se corta en rodajas finas con un cuchillo de ultramicrótomo y las rodajas se montan en un portaobjetos de metal (cobre).

Técnica de congelación: Es un método alternativo de preparación de muestras para visualizar orgánulos internos dentro de las células.

Las células se congelan rápidamente, luego se calientan → se fracturan con un cuchillo que expone los orgánulos internos → se someten a sublimación → se cubren con platino y carbono.

Las medidas para aumentar el contraste de EM incluyen:

  • Tinción con soluciones de sales de metales pesados ​​como citrato de plomo y acetato de uranilo
  • Tinción negativa con metales pesados ​​como ácido fosfotúngstico o acetato de uranilo.
  • Sombreado: La muestra se recubre con una película delgada de platino u otro metal pesado en un ángulo de 45 ° para que el metal golpee al microorganismo en un solo lado.

Analista de Laboratorio

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