Prueba de Rothera: Procedimiento, Principio y Resultados

Los cuerpos cetónicos en la orina son difíciles de detectar utilizando un procedimiento básico de análisis de orina. Afortunadamente, existe una prueba especial que tiene la capacidad de examinar las cetonas en la orina, y es en forma de prueba de Rothera.

Es un ensayo cualitativo se utiliza para detectar cuerpos cetónicos en la orina. Las cetonas se producen cuando se metaboliza la grasa. Los componentes específicos incluyen:

  • 78% de beta-hidroxibutirato
  • ácido acetoacético al 20%
  • acetona al 2%. (1, 2)

Para las personas con diabetes no controlada o que experimentan inanición, la síntesis de cetonas tiene lugar en el hígado para ser utilizada como fuente de energía.

Sin embargo, las cetonas demasiado altas en el torrente sanguíneo pueden provocar acidosis metabólica, que es un escenario común en las personas con diabetes.

En circunstancias normales, el nivel extra de cetonas en el torrente sanguíneo se excreta del cuerpo a través de la micción, y el exceso de cetonas en la orina se denomina cetonuria. (2, 3)

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Principio de la Prueba de Rothera

La acetona y el ácido acetoacético son reactivos con la solución alcalina presente en nitroprusiato de sodio, que forma un complejo de color púrpura.

Tiene la capacidad de detectar por encima de 10-20 mg/dl de acetona y por encima de 1-5 mg/dl de ácido acetoacético. Sin embargo, no tiene la capacidad de detectar beta-hidroxibutirato. (2, 3 y 4)

Requisitos y herramientas necesarias para realizar la prueba

  • Muestra de orina
  • Tubo de ensayo
  • El polvo de Rothera consiste en sulfato de amonio (20 gramos) y nitroprusiato de sodio (0,75 gramos)
  • Hidróxido de amonio / amoníaco líquido (3, 4 y 5)

¿Cómo realizar la prueba de Rothera?

  1. Prepare un tubo de ensayo limpio (estéril).
  2. Vierta una muestra de orina (5 ml) en el tubo de ensayo.
  3. Añadir una mezcla de polvo de Rothera (1 gramo) al tubo de ensayo. Asegúrese de que el polvo se incorpore completamente a la orina.
  4. Una vez que la mezcla se ha incorporado completamente, la siguiente etapa es añadir de 1 a 2 ml de hidróxido de amonio concentrado a la muestra.
  5. El hidróxido de amonio añadido crea una capa fina sobre la muestra.
  6. Ten cuidado con un anillo de color rosa púrpura que se forma en la interfaz. (5, 6 y 7)
prueba de rothera prueba de tira de cuerpos cetónicos de rothera

Interpretación de Resultados

Positivo Resultado

Si nota la aparición instantánea de un anillo de color púrpura permanganato, indica la presencia de cuerpos cetónicos. Por lo tanto, el resultado es positivo. (3)

Negativo Resultado

Si no ha notado la presencia de un anillo de color permanganato en la interfaz, significa que la muestra no tiene cuerpos cetónicos. Por lo tanto, el resultado es negativo.

Un tubo de ensayo que contiene un conjunto de solución de muestra para la prueba de Rothera. La presencia de un anillo de color púrpura permanganato indica un resultado positivo

Figura 2: Un tubo de ensayo que contiene un conjunto de solución de muestra para la prueba de Rothera. La presencia de un anillo de color púrpura permanganato indica un resultado positivo.

Precauciones de seguridad al realizar la Prueba Rothera

  • Asegúrese de lavar a fondo el aparato, especialmente el que debe ser estéril antes de usarlo.
  • Cuando manipule productos químicos, asegúrese de manipularlos con cuidado para evitar incidentes adversos.
  • Asegúrese de no entrar en contacto con una muestra de orina mientras realiza el experimento.
  • Cuando manipule el tubo de ensayo, asegúrese de no manipularlo con la mano desnuda, especialmente cuando haya una muestra en él. Utilice siempre soportes para tubos de ensayo.
  • Manipule todo el aparato con cuidado. colóquelos en los lugares adecuados después de cada uso. (4, 7, 8 y 9)

Preguntas Frecuentes

Q1. ¿Cuál es el nivel normal de cetonas?

El nivel normal de cetonas en la sangre está por debajo de 0,6 mmol/L. Si el nivel va más allá de 0,6, especialmente si alcanza 1,5 mmol/L, indica la posibilidad de CAD o cetoacidosis diabética, una afección que, si no se trata de inmediato, puede ser fatal. (6, 7)

P2. ¿Qué cuerpo cetónico no es detectado por la prueba de Rothera?

Los cuerpos cetónicos producidos por el hígado y utilizados por los tejidos extrahepáticos apenas se detectan mediante la prueba de Rothera debido a su baja concentración en la orina. (6)

Q3. ¿Cuál es la razón de la formación de anillo púrpura en la prueba de Rothera?

La formación de anillo púrpura (complejo de color lavanda-púrpura) en la prueba de Rothera es causada por la reacción de acetoacetato o acetona con glicina para dar nitroprusiato de sodio. (5)

Q4. ¿Qué indica la prueba positiva de Rothera?

Una prueba de Rothera positiva indica la presencia de cetonas en la orina, que es un signo afirmativo en personas con diabetes, especialmente si se encuentran en un estado de cetoacidosis diabética, que es una afección fatal cuando no se trata de inmediato. (4, 5)

Q5. ¿Qué pruebas se realizan para detectar cuerpos cetónicos en la orina?

Existen varias pruebas que se realizan para detectar la presencia de cetonas en la orina. Algunas de las pruebas más utilizadas incluyen la prueba de Rothera, que ayuda a detectar la presencia de acetona y ácido acetoacético. Otra prueba confiable es la prueba de cloruro férrico que ayuda a verificar el nivel de ácido acetoacético, pero no detecta la presencia de ácido β-hidroxibutírico. Otras pruebas que vale la pena mencionar incluyen la prueba de tira reactiva y el método de tableta acetest. (5, 6 y 7)

P6. ¿Puede tener cetonas sin tener diabetes?

Sí, es posible tener cetonas en la orina incluso si no tiene diabetes. Ocurre cuando el cuerpo utiliza la grasa como fuente de energía. En circunstancias normales, el cuerpo utiliza la glucosa como fuente de energía. Sin embargo, en las personas que experimentan inanición o que siguen una dieta estricta, el cuerpo depende de la grasa almacenada como fuente de energía. A medida que la grasa se descompone, uno de sus subproductos es una cetona. Las cetonas en la orina también se pueden observar en personas con un trastorno alimentario, que realizan ejercicios extenuantes, que experimentan vómitos crónicos o que siguen una dieta baja en carbohidratos. (4, 9 y 10)

Q7. ¿Por qué los diabéticos tienen cetonuria?

La producción de la cetona es alta en personas con diabetes y también en personas que están en ayunas. Conduce a un aumento de la producción de cetonas en el hígado. El cuerpo elimina el exceso de cetonas en el cuerpo a través de la micción, lo que provoca un alto nivel de cetonas en la orina o también conocido como cetonuria. (5, 6 y 8)

P8. ¿Puede dar Ketostix un falso positivo?

Ketosix es una de las pruebas utilizadas para detectar el nivel de cetonas en la orina. Sin embargo, el resultado es fiable solo si la gravedad específica de la orina es alta, oscila entre 1,010 y 1,020 y tiene un nivel de pH bajo. Sin embargo, también existe la posibilidad de un resultado falso positivo cuando la orina que se está analizando está muy pigmentada. (2, 5 y 9)

Referencia:

  1. https://en.wikipedia.org/wiki/Ketone_bodies
  2. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK247/
  3. https://www.youtube.com/watch?v=7tcdQ5FkFX0
  4. https://www.bioscience.com.pk/topics/pathology/clinical-pathology/item/822-tests-for-detection-of-ketones-in-urine
  5. https://microbiologynote.com/rotheras-test/
  6. http://laboratorytests.org/rotheras-test/
  7. https://medicalstudyzone.com/rotheras-test-by-nitroprusside-reaction/
  8. https://askinglot.com/what-is-the-principle-of-rotheras-test
  9. https://academic.oup.com/ajcp/article-abstract/30/6/530/1762948?redirectedFrom=PDF
  10. https://emedicine.medscape.com/article/2087982-overview

Analista de Laboratorio

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